操作规程 1、在96孔板加入细胞100μL/孔，通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔加入100微升5000～10000个细胞（具体每孔所用的细胞的数目，需根据细胞的大小，细胞增殖速度的快慢等决定）。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时. 2、.加入适当浓度的0～10μL 受试化合物。 3、将96孔板在37℃，含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小时，使MTT 还原为甲臜。 6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板摇床摇匀。 7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度（如无570nm 滤光片，可以使用560-600nm 的滤光片）。 8、结果分析 a、细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（*培养基加MTT，无细胞）或空白药物孔OD 值（*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT，无细胞），各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100 b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90) 中文名称：姬姆萨染液(10×) 英文名称： 产品规格：25ml 产品货号：BJ-01X6599 姬姆萨染料为天青色素、次甲蓝的混合物，本染色液适于血液涂抹标本、血球、疟原虫、立克次体以及骨髓细胞、脊髓细胞等的染色。 染前用蛋白酶等进行处理，然后再用姬姆萨染液染色，在染色体上，可以出现不同浓淡的横纹样着色。姬姆萨染液可将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。 试剂盒组份： 10×姬姆萨染色原液 25mL 10×姬姆萨稀释液 25mL 染色步骤1.根据需要量，取8ml 双蒸水，加入姬姆萨原液1ml,再加入姬姆萨稀释液1ml，混匀即为工作液，此工作液常温可保存两周（如果无法短期用完，请确保姬姆萨原液不要见到水或者其他缓冲液）。2.按常规方法制备血涂片，待血膜干后，用甲醇固定2～3 分钟；3.将血涂片或骨髓涂片放置染色架上，滴加2~3 滴染色工作液，使覆盖全部血膜（具体用量视样品大小而定），室温染色15～30 分钟。4.用自来水缓慢从玻片一端冲洗(注意勿先倒去染液或直接对血膜冲洗)，凉干后镜检。 四、注意事项1.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。2.如果染色过浓或者过淡，请调整姬姆萨原液加入量（姬姆萨原液常用的稀释比例是10 倍，但有时候可能会稀释5 倍或者15 倍）。3.姬姆萨原液采用常规方法配制（姬姆色素：甘油：甲醇=1：66：66），请在使用时小心不要接触到水。否则时间长了会失效。 储存：2～8℃，避光，有效期12个月。 |
细胞培养操作规程： 一．培养基及培养冻存条件准备： 1） 准备F-12K培养基；优质胎牛血清，10%；双抗，1%。 2） 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。 3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。 二． 细胞处理： 1） 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2） 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
细胞培养方法： 1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次； ②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化； ③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止； ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清； ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，T25培养瓶加6-8ml培养基； ⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏： ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。 3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清，用PBS或生理盐水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶） ②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化； ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞； ④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。 Influenza Virus A N3（AIV-N3）甲型流感（）病毒N3亚型RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用） 50次 低温 负20度 一年 2-4周 Herba cynomorii锁阳探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周 Semen arecae槟榔PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周 Mycobacterium asiaticum亚洲分枝杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Feline Herpesvirus type 1（FHV-1）猫疱疹病毒1型LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用） 50次 低温 负20度 一年 2-4周 Theileria parva小泰勒虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 狼源性成分LAMP试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 小鼠源性成分染料法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Lelystad Virus(LV)染料法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Avian Paramyxovirus (APMV)禽副粘病毒通用探针法荧光定量RT-PCR试剂盒（暂停） 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Avian Leukosis Virus(ALV)禽白血病病毒E亚群探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Propionibacterium acnes痤疮丙酸杆LAMP试剂盒 动物病原微生物检测（科研用）/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 姬姆萨染液(10×)沙氏葡萄糖液体培养基 英文名称：Sabouraud’s Glucose Broth Medium 产品规格：250g 人蛋白脂质蛋白抗体(PLP)免疫试剂盒现货供应 卫矛醇半固体 英文名称： 产品规格：20支 人Na+/H+交换体3(NHE3)免疫试剂盒*直销 猪钙/钙调素依赖性蛋白激2β(CAMK2B/CAM2/CAMKB)免疫试剂盒*直销 牛总蛋白S(TPS)免疫试剂盒现货供应 小鼠VIIIa轻链(F8aLC)免疫试剂盒进口、分装 鸡免疫球蛋白G(IgG)免疫试剂盒*直销 小鼠γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒现货供应 大鼠新喋呤免疫试剂盒现货供应 兔脂蛋白α(Lp-α)免疫试剂盒进口、分装
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