设为主页 加入收藏 联系我们

公司公告

更多公告>>
产品展示
当前位置:首页 > 产品展示 > >>>>奋森疏螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒
奋森疏螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒
点击放大
产品型号:
50T
产品报价:
2499
产品特点:
奋森疏螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
  50T奋森疏螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒的详细资料:

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。

特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据奋森疏螺旋体保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。

产品名称

奋森疏螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒

英文名称

Borrelia vincenti

货号

BJ-R6458

使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

原理:
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
检测方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。

细菌活力蓝色荧光(DAPI)检测试剂盒 进口/国产 规格:50次

 细胞/组织裂解悬、血、体等组蛋白ELISA定量试剂盒 进口/国产 规格:24/48/96次

二酯酶10A(Phosphodiesterase 10A) 进口/国产 规格:0.25单位

植物氢ATP酶(H+-ATPase)总活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

细胞甲基化组蛋白H3-K4染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒 进口/国产 规格:10次

二酯酶1A(Phosphodiesterase 1A) 进口/国产 规格:0.25单位

酵母镁ATP酶(Mg++ -ATPase)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

 组蛋白H3-K122(mono)甲基化检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次等

罗丹明123(RHODANMINE123)溶(50微摩尔) 进口/国产 规格:0.5毫升

细菌钙ATP酶(Ca++ -ATPase)活性比色法定量检测试剂盒 进口/国产 规格:20次

 组蛋白H4-K12乙酰化检测试剂盒 进口/国产 规格:10/20次等

树脂法微量全血DNA纯化试剂盒 进口/国产 规格:20次

奋森疏螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒葡萄糖酸钾分子式:234.2387英文名称:Potassium glucoseCAS号:299-27-4分子量: C6H11KO7

番茄汁英文名称:Tomato Juice分子式:862.74分子量:C42H38O20CAS号:81-27-6

2-溴二并呋分子式:247.09英文名称:2- two benzene and benzeneCAS号:86-76-0分子量: C12H7BrO

(S)-3-甲酸甲酯酸分子式:165.61798英文名称:(S) -3- methyl piperidine hydrochlorideCAS号:分子量: C6H12ClNO2

2--3-氟吡分子式:112.11英文名称:2- amino -3-CAS号:21717-95-3分子量: C5H5FN2

异辛酸钾分子式:英文名称:Potassium potassiumCAS号:35194-75-3分子量:

2,5-二羟磺酸钾分子式:228.26英文名称:2,5- two hydroxy benzene sulfonic acidCAS号:21799-87-1分子量: C6H5KO5S

2-丁-3-(4-羟甲酰)-5-硝并呋分子式:339.34英文名称:2- butyl -5- (4- hydroxy group) -3- nitrobenzene and theCAS号:141645-16-1分子量: C19H17NO5

(R)-1-Boc-3-氨甲分子式:214.3英文名称:(R) -1-Boc-3- ammonia methyl piperidineCAS号:140645-23-4分子量: C11H22N2O2

十三烷分子式:260.46英文名称:Thirteen benzeneCAS号:123-02-4分子量: C19H32

N-丙咪唑分子式:108.14英文名称:N- vinylCAS号:31410-01-2分子量: C6H8N2

产品相关关键字: 奋森疏螺旋体 探针法 荧光定量PCR试剂盒
 如果你对50T奋森疏螺旋体探针法荧光定量PCR试剂盒感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
 相关同类产品:
50T鹧鸪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒  50T马杜拉放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒  50T戈氏放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒 
50T化脓放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒  50T放线菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒  50T腺伴随病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 
50T腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒  50T腺病毒E型探针法荧光定量PCR试剂盒  50T欧洲放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒 
 
联系人:王经理
点击这里给我发消息
电话:
86-021-57763112
手机:
18917018169

安防展览网

推荐收藏该企业网站