设为主页 加入收藏 联系我们

公司公告

更多公告>>
产品展示
当前位置:首页 > 产品展示 > >>>>蜜蜂微孢子虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒
蜜蜂微孢子虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒
点击放大
产品型号:
50T
产品报价:
2499
产品特点:
蜜蜂微孢子虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒全新的热启动DNA聚合酶-Hot Start Taq DNA聚合酶,可在PCR反应的过程中抑制非特异扩增,从而最大限度地减少非特异性扩增产物的产生,提高荧光定量PCR反应的特异性。
  50T蜜蜂微孢子虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒的详细资料:

实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
3:结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤
典型的PCR由(1)高温变性模板;(2)引物与模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。

储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

产品名称

蜜蜂微孢子虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒

英文名称

Nosema spp.

货号

BJ-R7017

产品特点:
1. 蜜蜂微孢子虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒使用化学修饰的热启动聚合酶,反应特异性高,*程度地避免了非特异扩增;
2. 反应缓冲液经充分优化,反应灵敏快速,40个循环只需20多分钟;
3. 抗干扰能力强,反应重复性高,适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。
在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记:
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性:
(1)5′端标记有报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端标记有荧光淬灭基团 (Quencher, Q)
(3)探针完整,R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ,无荧光, R与Q分开,发荧光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探针
相对定量通过内标定量:
内标(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在细胞中的表达量或在基因组中定,受环境因素影响小,内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。

以下是公司正在热销的产品:

水解酪蛋白(酸)/酸水解酪蛋白/酸水解干酪素/Casein acid hydrolysateBR250/1000克国产/进口

紫褐小单孢菌 Micromonospora violaceofusca大鼠淋巴成纤维细胞完全培养基

异常汉逊酵母 Hansenula anomala人结直肠腺细胞

屎肠球菌 Enterococcus faecium嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus

酵母蛋白胨培养基1万毫升/袋国产/进口

人肺成纤维细胞完全培养基100mL

酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus

泡盛曲霉变种 Aspergillus awamori var.人角膜上皮细胞完全培养基

坂崎杆菌显色培养基/Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium用于坂崎杆菌的显色培养,坂崎杆菌显蓝色,其他肠杆菌显无色1升国产/进口

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GMCSF)重组蛋白英文名称:Recombinant Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF)

HFSF(人胚胎眼巩膜成纤维细胞)5×106cells/瓶×2

蜜蜂微孢子虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒PC-3M(人前列腺细胞)5×106cells/瓶×2

Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2

豇豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium vigna小鼠肾成纤维细胞完全培养基

BT-474(人腺导管细胞)5×106cells/瓶×2

钙联蛋白(CNX)重组蛋白英文名称:Recombinant Calnexin (CNX)

洛格酵母 Saccharomyces logos

MN-s, 小鼠纹状体神经元 Mouse

大鼠肾系膜细胞完全培养基100mL

NCI-H157(人非小细胞肺腺细胞)5×106cells/瓶×2

LIM培养基/赖氨酸吲哚动力培养基/赖氨酸靛基质动力培养基/LIM Medium用于链球菌的分离培养;细菌的赖氨酸、吲哚和动力复合生化试验250克国产/进口

NCI-H2170(人肺鳞细胞)酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

产品相关关键字: 蜜蜂微孢子虫通用 探针法 荧光定量PCR试剂盒
 如果你对50T蜜蜂微孢子虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
 相关同类产品:
50T鹧鸪源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒  50T马杜拉放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒  50T戈氏放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒 
50T化脓放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒  50T放线菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒  50T腺伴随病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 
50T腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒  50T腺病毒E型探针法荧光定量PCR试剂盒  50T欧洲放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒 
 
联系人:王经理
点击这里给我发消息
电话:
86-021-57763112
手机:
18917018169

安防展览网

推荐收藏该企业网站