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Aurora A抑制剂(Alisertib)
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Aurora A抑制剂(Alisertib)公司正在出售的产品:2 ug pMAL-p5E pMAL-p5E 低温运输,-20℃保存双水解(绿脓杆菌) 20支1瓶 RKO-AS45-1细胞株 RKO-AS45-1 低温运输和保存液体双抗增菌液 Liquid Double Anti Bacteria 250g5g 胞 Cytosine 室温保存
  Aurora A抑制剂(Alisertib)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:Aurora A抑制剂(Alisertib)

英文名称:Alisertib

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

产品货号:BJ-01X7118

英文名称:Alisertib

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

Alisertib是一种具有选择性的Aurora A抑制剂,IC50值为1.2nM,对Aurora A的选择性高于Aurora B。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1028486-01-2

别名:MLN 8237

纯度:99.43%

分子量:518.92

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

花生源性成分PCR检测试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Mouse Anti-rat IgG/Cy3  Cy3标记的小鼠抗大鼠IgG 规格: 0.1ml

Theileria parva小泰勒虫LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周COX7A2  氧化7A2抗体 规格: 0.1ml

Rigidoporus lignosus橡胶白根病PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Rabbit anti-mouse IgG whole serum  兔抗小鼠IgG抗清 规格: 1ml

Folium mori桑叶PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周Phospho-PKC gamma (Thr514)  磷酸化蛋白激C亚型G抗体 规格: 0.1ml

Covert Mortality Nodavirus(CMNV)偷死野田村病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周SENP1  小泛素相关修饰蛋白1抗体 规格: 0.2ml

Porcine Adenovirus(Swine Adenovirus)猪腺病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 1-2周NCoR1  核受体辅助抑制因子1抗体 规格: 0.1ml

Bulbus fritillariae cirrhosae川贝母探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周TIAF1  TGFB1诱导抗凋亡因子1抗体 规格: 0.2ml

Culex spp.库蚊通用LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周phospho-RAD9(Ser328)  磷酸化细胞周期检查控制蛋白质抗体 规格: 0.1ml

Bovine Reovirus牛呼肠孤病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-3周Rabbit Anti-chicken IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗鸡IgG 规格: 0.1ml

Folium eriobotryae枇杷叶LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 20度 一年 2-4周SUMO 1  类泛素蛋白抗体 规格: 0.1ml

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