| 以下是人elisa试剂盒的订购信息: | 产品名称 | 兔子表皮生长因子(EGF)elisa检测试剂盒品牌 |  | 英文名称 | Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit  |  | 规格 | 96T/48T | 
 产品名称:兔子表皮生长因子(EGF)elisa检测试剂盒品牌英文名称:Rabbit Epidermal growth factor,EGF ELISA Kit
 规格:96T/48T
 保存温度:2-8℃低温保存
 运输方面:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货
 兔子表皮生长因子(EGF)elisa检测试剂盒品牌操作流程示意:
 
   兔子表皮生长因子(EGF)elisa检测试剂盒品牌试剂配制
 1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
 2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
 3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
 4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
 5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
 6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
 7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
 8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
 9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
 10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
 兔子表皮生长因子(EGF)elisa检测试剂盒品牌注意事项:
 1.加样:
 ①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
 ②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
 ③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
 2.温育:
 ①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
 ②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
 ③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
 3.洗板:
 ①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
 ②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
 ③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
 4.显色:
 ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
 5.判定:
 读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
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 2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照 50μl。然后在待测样品孔先 加样品稀释液 40μl,然后再加待测样品 10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
 3.温育:用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。
 4.配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用。
 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此 重复 5 次,拍干。
 6.加酶:每孔加入酶标试剂 50μl,空白孔除外。
 7.温育:操作同 3。
 8.洗涤:操作同 5。
 9.显色:每孔先加入显色剂 A50μl,再加入显色剂 B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10 分钟.
 10.终止:每孔加终止液 50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
 11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止 液后 15 分钟以内进行。
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