操作规程 1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时. 2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。 3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。 4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。 5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。 6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。 7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。 8、结果分析 a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100 b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90) 中文名称:油红O染色液(细胞涂片专用) 英文名称: 产品规格:4×20ml|4×50ml 产品货号:BJ-01X6883 用途: 专门用于脂肪/脂滴染色 注意事项: 主要由油红O异丙醇饱和液组成,染色后脂滴呈橘红色。 储存条件:4℃,12个月 |
细胞培养操作规程: 一.培养基及培养冻存条件准备: 1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。 2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。 3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 二. 细胞处理: 1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。 2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
细胞培养方法: 1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次; ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化; ③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止; ④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清; ⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基; ⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。 2、细胞复苏: ①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。 ②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。 3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种 ①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶) ②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化; ③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞; ④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。 Fructus sophorae槐角染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周SKA1 纺锤体和着丝粒相关蛋白1抗体 规格: 0.2mlUACA 葡萄膜自身抗原Uaca抗体 规格: 0.2ml Hepatitis B Virus(HBV)乙型肝炎病毒C型LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周MAP3K8/TPL2 丝裂原活化蛋白激激8抗体 规格: 0.2mlPRMT5 组蛋白甲基转移5抗体 规格: 0.2ml Human Herpesvirus-8(HHV-8)人疱疹病毒8型探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周RASSF6 RAS家族关联结构域蛋白6抗体 规格: 0.2mlRabbit Anti-mouse IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的兔抗小鼠IgG 规格: 0.1ml Cortex acanthopanacis五加皮探针法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周IRAK1 白介素-1受体相关激1抗体 规格: 0.1mlRAB38 G蛋白结合蛋白RAB38抗体 规格: 0.2ml Piscirickettsia salmonis鲑鱼立克次氏体LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周ASBT/SLC10A2 顶膜钠依赖性胆盐转运体蛋白抗体 规格: 0.2mlSSB/La 干燥症SSB/La抗体 规格: 0.2ml Nematodirus helvetianus微黄*线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周CLASP2 细胞连接相关蛋白2抗体 规格: 0.2mlMSH Alpha 促黑细胞激素α抗体 规格: 0.1ml Eikenella corrodens啮蚀艾肯染料法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周TrK A/NTRK1 酪激A抗体 规格: 0.1mlphospho-14-3-3 protein zeta/delta(Ser58) 磷酸化14-3-3 α/β/ζ抗体 0.1ml Cochliomyia hominivorax嗜人锥蝇LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周C10orf63/Enkurin 10号染色体开放阅读框63抗体 规格: 0.2mlPXR 孤儿核受体PAR1抗体 规格: 0.2ml Brucella bovis牛布鲁氏杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周ROC1/RNF75 环指蛋白75抗体 规格: 0.2mlSTIM1 基质交分子1抗体 规格: 0.2ml Folium mori桑叶LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周DEDD2 死亡效应结构域蛋白2抗体 规格: 0.2mlMidkine 中期因子/肝素结合生因子抗体 规格: 0.1ml 油红O染色液(细胞涂片专用)人催乳素(PRL)免疫试剂盒进口、组装 和厚朴酚 : 35354-74-6 规格: HPLC≥98%;20mg 订购|咨询 人D-乳酸免疫试剂盒进口、分装 猪γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒进口、分装 牛铜蓝蛋白(CP)免疫试剂盒进口、组装 小鼠化蛋白激B(P-PKB)免疫试剂盒*直销 鸡多巴胺(DA)免疫试剂盒进口、分装 小鼠N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯(AcSDKP)免疫试剂盒进口、组装 大鼠B12(VB12)免疫试剂盒进口、组装 兔胶原吡啶交联(PYD)免疫试剂盒*直销 大鼠骨成型蛋白受体1A(BMPR-1A)免疫试剂盒进口、分装
|