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影响ELISA试剂盒检测因素
点击次数:488 更新时间:2016-04-05

ELISA试剂盒即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。 由于ELISA方法灵敏,特异性强不需要特殊设备,所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。

溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),ELISA试剂盒在洗涤过程中往往难以*洗脱,它可使H2O2释放出原生态氧(O),从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,产生假阳性[2]。所以严重溶血标本禁用。
    标本受细菌污染。因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的标本同溶血标本一样,亦可产生非特异性显色而干扰测定结果。

塑料试管能吸附抗原物质,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。使用真空采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。

标本保存不当。在冰箱中保存过久的标本,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、造成假阳性;为克服上述干扰,ELISA试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5 d内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。

标本凝固不全。 在工作中,有时为了争取时间快速检测,ELISA试剂盒常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;因此血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清。

CPLA2 beta    胞浆型磷脂酶A2抗体
CETP    胆固醇酯转移蛋白抗体
Claudin 6    紧密连接蛋白6抗体
phospho-Claudin 6    磷酸化紧密连接蛋白6抗体
CENPT    着丝粒蛋白T抗体
CAPD2    染色体相关蛋白2抗体
CENPP    着丝粒蛋白P抗体
CDCA5    细胞分裂周期相关蛋白5抗体
CAPG2    染色体相关蛋白2抗体
CDC10    细胞周期调控因子10抗体
CEP97    中心体蛋白97kDa抗体
CCDC11    卷曲螺旋结构域蛋白11抗体
CEP55    中心体蛋白55kDa抗体
AVSD2    富含半胱氨酸与表皮生长因子样蛋白2抗体
CKAP2    细胞骨架相关蛋白2/肿瘤和微管相关蛋白抗体

Coxsackie Adenovirus Receptor    柯萨奇病毒蛋白受体B抗体
CDC4    肿瘤抑制因子FBW7抗体
Cell adhesion molecule 4    细胞粘附分子4抗体
CAMTA1    钙调蛋白结合转录激活因子1抗体
CDK5RAP3    周期素依赖性激酶5激活结合蛋白C53抗体
CENPH    着丝粒蛋白H抗体
Cystatin E    半胱氨酸蛋白酶抑制剂6抗体
CA10    碳酸酐酶相关蛋白/脑蛋白10抗体
IL-18R alpha/CD218a    白细胞介素-18受体α链抗体
CTCF    转录阻抑蛋白CTCF抗体
CD1a    T淋巴细胞CD1抗体

 

 

ELISA试剂盒

联系人:王经理
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