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大鼠试剂盒检测程序方法
点击次数:153 发布时间:2021-01-28

大鼠试剂盒检测程序:
1.  加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板:同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6.  洗板:同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

大鼠试剂盒步骤:

1.加样

  1. 除包被外都需45度加样

  2.加样体积要准确

  3.管底加样,不能加在管壁上

  4.加样时不能产生气泡

2.温浴  

  1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。

  2.各ELISA板不应叠在一起。

  3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。

  4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。

3.洗涤  

  1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。

  2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。

4.读板  

  1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。

  2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。

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