ELISA试剂盒试验原理：

被石蜡包埋的组织切片在二甲苯中脱去石蜡并逐级水化后，进行内源性的过氧化物酶淬灭。内源性过氧化物酶可以被甲醇或Zymed's Peroxo-Block （目录号:00-2015）中的3％的过氧化氢所抑制。
说明：非免疫血清用来去除非特异性背景。孵育一抗后，加入二抗，再经过一步冲洗，加入链霉亲和素过氧化物酶藕联物。

ELISA试剂盒操作步骤：

1.使用前将ELISA试剂盒置室温30分钟，恢复至室温。

2.取所需用量酶标板条，设空白对照1孔、阴性/阳性对照各2孔，未用的板条尽快密封，2～8℃保存。

3.空白对照孔加样品稀释液100μl；阴、阳性对照孔分别加入阴、阳性对照100μl；样品孔每孔加入稀释后的样品100μl。

4.混匀，置37℃反应30分钟。

5.扣去孔内液体，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，拍干。

6.每孔加酶标记物100μl（空白孔除外）。置37℃反应30分钟。

7.洗涤，同步骤5。

8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl，混匀，37℃避光反应10分钟。

9.每孔加终止液50μl，混匀，用空白孔调零，于450nm(可用630nm作参比波长）测定各孔吸光值（A值）。

ELISA试剂盒样本处理：

1．刚取得的新鲜组织样本用PBS洗净。

2．准确称取50mg组织，加入1ml匀浆缓冲液A，用玻璃匀浆器充分匀浆。

3．在1000g，4℃离心10分钟，弃沉淀，取上清。