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双重泛PI3K/mTOR抑制剂(GNE-493)
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双重泛PI3K/mTOR抑制剂(GNE-493)公司正在出售的产品:Phospho-p63 (Ser395) 磷酸化P63瘤抑制基因抗体 规格: 0.1mlphospho-SCNN1B(Ser633) 磷酸化上皮钠通道β2抗体 规格: 0.1mlthrombin II 凝Ⅱ(凝因子II)抗体 规格: 0.1mlSMARCA2/BRM ATP依赖解旋SMARCA2抗体 规格: 0.2mlM
  双重泛PI3K/mTOR抑制剂(GNE-493)的详细资料:

操作规程

1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.

2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。

3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。

4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。

7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。

8、结果分析

a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(完全培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(完全培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)

中文名称:双重泛PI3K/mTOR抑制剂(GNE-493)

英文名称:GNE-493

产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg

产品货号:BJ-01X8278

GNE-493是一个高效选择性且具的双重泛PI3K/mTOR抑制剂,对PI3Kα/PI3Kβ/PI3Kγ/PI3Kδ/mTOR的IC50值分别为3.4/12/16/16/32nM。

注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!

CAS号:1033735-94-2

纯度:98.19%

分子量:372.44

储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。

细胞培养操作规程:

一.培养基及培养冻存条件准备:

1) 准备F-12K培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。

2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。

3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

二. 细胞处理:

1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。


2.png

细胞培养方法:

1、细胞传代:细胞密度达到80-90%时即可传代

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆盖整个瓶或皿,盖好放入培养箱消化;

③1-2min后,显微镜下观察细胞,若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;若细胞还是贴壁,放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止;

④将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清;

⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中,T25培养瓶加6-8ml培养基;

⑥悬浮细胞直接离心收集,细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。

2、细胞复苏:

①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化,时间1min左右,加入4-5ml培养基混匀。

②在1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1-2ml培养基吹匀,将细胞悬液加入培养瓶中,补加适量培养基。

3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种

①弃去培养上清,用PBS或生理盐水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,显微镜下观察细胞,大部分细胞回缩且有少量细胞脱落,轻轻吹打下确认消化情况后加入完全培养基终止消化;

③将细胞悬液1000RPM左右条件下离心4min,弃上清,加1ml冻存液重悬细胞;

④将冻存管放入程序降温盒,放入-80℃冰箱,4小时后将冻存管转入液氮罐储存。

IL12Rb2 基因全长ORF克隆牛血清白蛋白(BSA)免疫试剂盒现货供应

CDH8 基因全长ORF克隆牛血清白蛋白(ALB)免疫试剂盒特价直销

CHL-1 基因全长ORF克隆 (表达载体)牛血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)免疫试剂盒进口、组装

SerpinC1 基因全长ORF克隆牛血管内皮生长因子C(VEGFC)免疫试剂盒进口、分装

Furin 基因全长ORF克隆牛雄烯二酮(ASD)免疫试剂盒现货供应

CD171 / NCAM-L1 转录变体2 基因全长ORF克隆牛新包虫抗体免疫试剂盒特价直销

IL1F2 / IL1B 基因全长ORF克隆牛锌金属硫蛋白(Zn-MT)免疫试剂盒进口、组装

IL17Rb 基因全长ORF克隆牛心肌肌钙蛋白T(cTn-T)免疫试剂盒进口、分装

RB1 / OSRC 基因全长ORF克隆牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫试剂盒现货供应

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RPS6KA5 / MSK1 转录变体1 基因全长ORF克隆牛纤维蛋白原(Fb)免疫试剂盒进口、组装

双重泛PI3K/mTOR抑制剂(GNE-493)肌酸激酶MB同工酶测定试剂盒(免疫抑制法)  R1:40ml×1 R2:10ml×1  Creatine kinase MB isoenzyme Assay Kit100g 氯化镁六水 Magnesium Chloride, Hexahydrate 室温干燥保存

甘油含量测试盒(液体)(微量酶标法)  300T  Glycerol Assay Kit50T 梅毒螺旋体PCR检测试剂盒  低温运输,-20℃保存

甘油三酯测试盒(液体)  100ml  Triglycerides Assay Kit5 mg Dihydroethidium(超氧化物阴离子荧光探针) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

脑脊液蛋白测试盒(磺基水杨酸法)  50管/48样  CSF protein Assay Kit250mL Bicarbonate Buffer(盐缓冲液),1M,pH9.0  Bicarbonate Buffer,1M,pH9.0  常温保存

尿胆原测试盒  50管/48样  Urobilinogen test kit25mL 超敏化学发光(HRP)检测试剂盒 Ultrasensitive ECL Kit 4℃保存

二氧化碳结合力测试盒(滴定法)  2ml×3×10  Carbon dioxide combining power test kit2 ug pACYCDuet-1 pACYCDuet-1 低温运输,-20℃保存

血红蛋白测试液(HICN比色法)  1ml/35样  Hemoglobin test solution支原体琼脂培养基(含) Mycoplasma Agar Base 250g

γ-谷氨酰转移酶测试盒(比色法)  100管/50样  γ- Glutamyl transferase Assay Kit1瓶 FRhK-4细胞株 FRhK-4 低温运输和保存

尿素氮测试盒(脲酶法)  100管/96样  Urea Assay Kit含225ml10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤均质袋 10% NaCl Trypticase Soy Broth 10个/包

尿素氮测试盒(二乙酰肟比色法)  100管/96样  Urea Assay Kit1500 U 限制性内切EcoRV Restriction Endonuclease -20℃保存

尿酸测试盒(比色法)  50管/48样  Uric acid Assay Kit100mL Prehybridization Solutions in SSC  Prehybridization Solutions in SSC  常温保存

 


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