操作步骤: 实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。 1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。 2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。 3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。 5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。 7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。 8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。 特别提醒:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。 产品名称 | 土壤几丁质酶测试盒50管/24样 | 规格 | 50管/24样 | 检测方法 | 可见分光光度法 | 货号 | BJ-01S10058 |
商品介绍: 测定意义: 几丁质主要存在于虾、蟹、昆虫等甲壳类动物的外壳与软体动物的器官(例如乌贼的软骨),以及真菌类的细胞壁中,而几丁质酶(EC 3.2.1.14)可催化几丁质水解,具有抵御真菌侵染的作用,成为抗真菌病害的研究热点。 测定原理 几丁质酶水解几丁质产生N-乙酰氨基葡萄糖,进一步与对二甲氨基产生红色化合物,在585nm处有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了几丁质酶的活性。 自备实验用品及仪器 天平、水浴锅、离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板,甲苯、蒸馏水。 |
测定步骤: 1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。 2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。 3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制) 4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。 5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂) 选择抗凝的注意点: ①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致; ②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固; ③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆); ④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。 Bean Pod Mottle Virus(BPMV)菜豆荚斑驳病毒RT-PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 马源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒 种源性检测/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Enteroadhesive E.Coli(EAEC)肠粘附性大肠杆探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Rhizoma typhonii白附子LAMP鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周 Tobacco Necrosis Virus(TNV)烟草坏死病毒RT-PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Aphanomyces invadans侵入性丝囊霉(溃疡综合症病原)探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Flos sophorae槐花染料法PCR鉴定试剂盒 中药材鉴定试剂盒/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-4周 Lelystad Virus(LV)探针法荧光定量RT-PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Wildebeest-associated Malignant Catarrhal Fever Virus (WA-MCF)牛羚关联恶性卡他热病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Stagonospora sacchari甘蔗壳多胞叶枯病PCR试剂盒 植物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Porcine Epidemic Diarrhea Virus(PEDV)猪流行性腹泻病毒RT-LAMP试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 Madurella grisea灰马杜拉分枝探针法荧光定量PCR试剂盒 动物病原微生物检测(科研用)/定做种属检测试剂盒 50次 低温 负20度 一年 2-3周 土壤几丁质酶测试盒50管/24样抗体/蛋白标记制备试剂盒 3次(100微克/次) 细胞顶体(acrosin)活性比色法定量试剂盒 20次 体液前列腺型酸型性(PACP)活性比色法定量检测试剂盒 20次 冰冻切片组织MAPK蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 10/20次 细胞二酯4(PDE4)活性连续循环光谱法定量检测试剂盒 10次 RUNX3蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 25次 TEM电镜石蜡切片免疫组织化学AP联NBT/BCIP间接检测试剂盒(含AP二抗) 20次 组蛋白脱乙酰化10(HDAC10)活性比色法定量检测试剂盒 20次 组织乙酰酯活性荧光法定量检测试剂盒 20次 基质金属蛋白(MMP)胶原蛋白谱法(collagen-zymography) 5次 组织长链脂酰辅A脱氢(ACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量检测试剂盒 20次 |