设为主页 加入收藏 联系我们

公司公告

更多公告>>
产品展示
当前位置:首页 > 产品展示 > >>>>副溶血性弧菌//三重探针法荧光定量PCR试剂
副溶血性弧菌//三重探针法荧光定量PCR试剂
点击放大
产品型号:
50T
产品报价:
2499
产品特点:
副溶血性弧菌//三重探针法荧光定量PCR试剂盒调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保温7min。
  50T副溶血性弧菌//三重探针法荧光定量PCR试剂的详细资料:

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行。设立一个专用的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。

特点:
1. 即开即用,用户只需要提供病毒样品。
2. 根据副溶血性弧菌//三重保守序列设计的专一性引物,与相关病毒无交叉反应。
3. 灵敏度可以达到几百拷贝/反应。
4. 一管式荧光定量 PCR 检测,避免后续污染。
5. 本试剂盒足够 50 次 20μL 反应体系的荧光定量 PCR。
6. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
储存条件:-20℃以下,有效期12个月。

产品名称

副溶血性弧菌//三重探针法荧光定量PCR试剂

英文名称

toxR/tdh/trh

货号

BJ-R7372

使用方法:
一、样品采集:
1、食品样品:样品的采集与预培养按照样品的采集与预培养按照菌检验要求进行。
2、血液样品:用无菌注射器抽取受检者静脉血2mL,注入无菌EDTA2Na(或柠檬酸钠)抗凝管,立即混匀。
3、粪便样品:取粪便置于灭菌的收集管中送检。
4、病灶部位样品:取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
一、稀释 PCR 阳性对照(以 10E2-10E7 拷贝/μL 这 6 个 10 倍稀释度为例)
1. 注意:由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 标记 6 个离心管,分别为 7,6,5,4,3,2。
3. 用带芯枪头分别加入 45 μL 荧光 PCR 专用模板稀释液(用带芯枪头,下同)。
4. 在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照,充分震荡 1 分钟,得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
5. 换枪头,在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用
6. 换枪头,在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7. 重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。

原理:
所谓实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
检测方法
1.SYBRGreenⅠ法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。

二十五英文名称:Twenty-five acid分子式:382.67分子量: CH3(CH2)23COOHCAS号:

洛缌英文名称:Luo Si分子式:296.3157分子量: C15H20O6CAS号:85026-55-7

4,4'-二叔丁-2,2'-联吡分子式:268.4英文名称:4,4'- tert butyl -2,2'- bipyridineCAS号:72914-19-3分子量: C18H24N2

2,4-二氯喹唑啉分子式:199.04英文名称:2,4- two chloroquine cefazolinCAS号:607-68-1分子量: C8H4Cl2N2

4-酸分子式:110.16英文名称:4- cyano piperidine hydrochlorideCAS号:4395-98-6分子量: C6H10N2

1--4-(三氟甲氧)分子式:288.01英文名称:1- -4- (three f) benzeneCAS号:103962-05-6分子量: C7H4F3IO

N,N'-硫羰二咪唑分子式:178.21英文名称:N'-, N twoCAS号:6160-65-2分子量: C7H6N4S

2-吡分子式:205英文名称:2- iodideCAS号:5029-67-4分子量: C5H4IN

2-羟-4-三氟甲氧溴分子式:英文名称:2- hydroxy -4- methoxy - three fluorideCAS号:分子量:

久亚砜分子式:278.353英文名称:Long acting Avia sulfoneCAS号:20301-63-7分子量: C6H15O4PS3

3,4-二氟三氟甲分子式:182.09英文名称:3,4- three f two fCAS号:32137-19-2分子量: C7H3F5

副溶血性弧菌//三重探针法荧光定量PCR试剂大鼠小梁网细胞完全培养基嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus

宇佐美曲霉 Aspergillus usamiiMM, 小鼠小胶质细胞

甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础/MYP琼脂基础/MYP agar base蜡样芽孢杆菌的固体平板计数250克国产/进口

大鼠颌下腺上皮细胞完全培养基100mL

瘤菌豇豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium vigna

人套细胞淋巴瘤细胞英文名称:JeKo-1

CHO, 中国仓鼠卵巢细胞系酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

酵母浸出粉/酵母粉/干酵母/酵母提取物/酵母浸粉/酵母浸膏粉/酵母萃取物/酵母抽提物/Yeast extract powderBR250/500克国产/进口

米霉人肌肉组织来源细胞

2216E琼脂/2216E Agar用于海生菌试验250克国产/进口

稻梨孢 Pyricularia oryzae扣囊复膜孢酵母 Saccharomycopsis fibuligera

产品相关关键字: 副溶血性弧菌//三重 探针法 荧光定量PCR试剂盒
 如果你对50T副溶血性弧菌//三重探针法荧光定量PCR试剂感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

留言框

  • 产品:

  • 留言内容:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 详细地址:

  • 省份:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7
 相关同类产品:
96T/48T人多巴胺D2受体(D2R)ELISA试剂盒  96T/48T人心钠肽(ANP)ELISA试剂盒  96T/48T人神经调节蛋白1(NRG-1)ELISA试剂盒 
96T/48T人活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒  96T/48T人白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒  96T/48T人脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒 
96T/48T人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)ELISA试剂盒  96T/48T人二级淋巴组织趋化因子(SLC/CCL21)ELISA试剂盒  96T/48T人XC趋化因子受体1(XCR1)ELISA试剂盒 
 
联系人:王经理
点击这里给我发消息
电话:
86-021-57763112
手机:
18917018169

安防展览网

推荐收藏该企业网站