ELISA动物种类的选择主要根据抗原的生物学特性和所要获得抗血清数目，如一般制备抗r-免疫球蛋白抗血清，多用家兔和山羊，因动物反应良好，而且能够提供足足数目的血清，用于免疫的动物应适龄，健壮，无感染性疾患，为雄性，此外还需十分留意动物的饲养，以消除动物的个体差异以及在免疫过程中死亡的影响。放血过程中要严格按无菌要求进行。在无菌前提，吸出血清，分装（0.05～0.2ml），贮于-40℃以下冰箱，或冻干后贮存于4。取动脉或静脉放血时，将兔放入一个特造的木匣或笼内，耳露于箱（笼）外，也可由另一人抓住兔身。为避免损失抗原，亦可用一打针器装抗原液，另一打针器装佐剂，二者以聚乙烯塑料管连接，然后二者往返反复抽吸，约数十分钟后即能*乳化。交叉反应率一般是用竞争按捺曲线来判定的。若用兔，用纯种新西兰兔，一组三只，兔的体重以2～3kg为宜。
家兔是zui常用以产生抗体的动物，因此这里主要讨论兔血的收集。通常，特异性是以交叉反应率来表示的。颈动脉放血时，将兔仰卧，固定于兔台，剪去颈部的毛，切开皮肤，暴露颈动脉，插管，放血。以不同浓度的抗原和近似抗原物质分别做竞争按捺曲线，计算各自的结合率（B/T或B/B0），求出各安闲IC50时的浓度，按下列公式计算交叉反应率。二礼拜后，可在另一耳放血。此法可反复多次放血。