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液固吸附色谱的原理
点击次数:387 更新时间:2016-06-02

液固吸附色谱
以吸附剂为固定相,以不同极性的溶剂为流动相,根据试样中各组分吸附能力的不同而进行分离的方法,称液相吸附色谱。在HPLC中常用全多空型硅胶微粒为吸附剂,直径5-10um,由于颗粒小且多空,故柱效很高。ELISA试剂盒
液-液分配色谱
流动相与固定相均为液体的色谱法,称液-液分配色谱法或简称液-液色谱法,按照固定相和流动相极性的差别,可分为正相和反相色谱法两类。
正相液液色谱法 流动相极性小于固定相的液-液色谱法称正相液-液色谱法。洗脱时,极性小的组分先流出色谱柱,极性打的组分在固定相中溶解度大,后流出色谱柱。
原始的正相色谱以含水硅胶为固定相,以乙烷经等为流动相,由于固定液易流失,已被化学键合色谱法取代,化学键合相是将固定液化学键键合在载体表面形成的固定相。正相色谱常用的氰基键合相,性质与硅胶的性质差异较大,常用语糖类的分析。
正相色谱以邮寄溶剂为流动相,使用成本较高。
反相液-液色谱法 流动相极性大于固定相的液-液色谱法称反相液-液色谱法,洗脱时样品中急性大的组分县流出色谱柱。为了防止固定液的流失,反相色谱法均使用化学键合相,典型的反相化学键合相,用多孔载体上化学键合的十八烷基为固定相,流动相常用甲醇-水和乙腈-水。非典型反相色谱系统,由弱极性或中等极性的键合相和极性大于固定相的流动相构成。
反相键合色谱法固定相不流失,流动相以水为主,用甲醇或乙腈调节极性,应用范围很宽,且使用成本低,用HPLC中应用zui广。
一般的反相色谱法,主要用于分离分析非极性和中等极性的化合物,但用两种改进的方法,亦可分离离子化合物。其一为离子对色谱法,在流动相中加入样品离子的反粒子,使其与样品离子构成不荷电的中性离子对,增加其在非极性固定相中的溶解度,使分配系数增加,改善分离效果。分析碱类时可在流动相中加入烷基磺酸盐(PIC),分析酸类则加入四丁基胺磷酸盐(TBA)等。这种方法可以使C18柱子一柱多用,用其取代离子交换法,可避免离子交换法流动相对泵和流路的腐蚀,缺点是PIC试剂较贵,其二为离子抑制色谱法,通过调节流动相的PH,抑制样品则分的解离,增加其在固定相中的溶解度。在流动相中加入醋酸等弱酸,氨水等弱碱,磷酸盐及醋酸盐等缓冲盐调节ph即可用于分离有机酸和有机碱。这种方法比离子对法成本低,但重复性差,且要注意,流动相PH应在2-8之间,超出此范围可能使键合基团脱落、试验后要及时用不含缓冲盐的流动相冲洗,以防腐蚀仪器流路系统。

EphB2 R    酪氨酸蛋白激酶受体B2抗体
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167)    磷酸化雌激素受体ER alpha 抗体
EGFP    重组增强型绿色荧光蛋白抗体
ER-Alpha    雌激素受体α抗体(用于western blot)
Estrogen Receptor alpha + beta    雌激素受体α/β抗体
Anei-ENPP2    自分泌运动因子抗体
Ephrin A3    酪氨酸蛋白激酶A3受体抗体
EHM2    EHM2蛋白抗体
phospho-eIF4E (Ser209)    磷酸化真核翻译起始因子4E抗体
eEF1A1    翻译延伸因子EF-1a抗体
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537)     磷酸化雌激素受体α抗体
phospho-EGFR (Tyr1068)    磷酸化表皮生长因子受体抗体
phospho-Erk1 (Thr202 + Tyr204)     磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1抗体
phospho-ERK1 (Thr202/Tyr204) + ERK2 (Thr183/Tyr185)    磷酸化丝裂原活化蛋白激酶1/2抗体

ELISA试剂盒

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