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血浆中水杨酸的HPLC测定法
点击次数:472 更新时间:2016-05-24

一、目的要求ELISA试剂盒
1、掌握血液样品前处理方法
2、掌握回收率测定方法和计算方法、
二、主要仪器和药品。
 液相色谱仪,ODS分析柱,水杨酸标准品,空白血浆,标准血样。
三、实验方法
水杨酸(Salicylic Acid)
水杨酸69-72-7
色谱条件与系统适用性试验:色谱柱:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(150mm x 4.6mm,5um)流动相:甲醇-(10mmol/L,ph3.0)(5:5):流速1ml/min:检测波长230nm:进样体积20uL.理论板数以水杨酸峰计不低于2000.
血浆中水杨酸回收率测定:取水杨酸标准品适量,加甲醇溶解并稀释成0.5mg/mL的对照品溶液,取适量用流动相稀释成20ug/ml的标准品的稀释液。另取空白血浆0.4ml,加入25ul水杨酸对照品溶液,漩涡混匀,加入0.2ml6%高氯酸沉淀蛋白,10000r/min离心10min,取上清液作为样品测定液。同法制备血浆空白液,取对照品稀溶液,样品测定液和需将空白页各20ul、进行,记录色谱图。
回收率计算:根据对照品稀溶液浓度,峰面积和样品测定液峰面积,水杨酸加入量,计算回收率。对照品稀溶液浓度C对=20ug/ml,样品测定液中加入的水杨酸浓度Cm=(0.023 x 500)/(0.4+0.2+0.025)=20ug/ml,所以血浆中水杨酸回收=A样/A对 x 100%
四、注意事项
1、标准品溶液与样品液必须分别重复进行三次,取平均峰面积进行计算。
2、外标法测定含量,样品处理中应严格定量操作。
3、为获得高的精密度,惊醒量必须大于定量环容积的2-3倍

phospho-CD32B    磷酸化CD32B抗体
Complement C3    过敏毒素C3抗体
CD66c    癌胚抗原抗体相关细胞粘附分子抗体
CPEB1    细胞质多聚腺苷酸结合蛋白1抗体
CST7    半胱氨酸蛋白酶抑制剂7抗体
C22orf29    22号染色体开放阅读框29抗体
Contactin-1    神经细胞表面蛋白F3
Cathepsin C/DPP1    组织蛋白酶C抗体
Caspase 4    半胱胺酸蛋白酶蛋白-4抗体
caspase-3 p12 subunit    活化半胱胺酸蛋白酶蛋白3抗体
C7ORF61    7号染色体开放阅读框61抗体
Claudin 11    少突胶质细胞跨膜蛋白抗体

ELISA试剂盒

联系人:王经理
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