ELISA试剂盒中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下倒置混和，不要在混匀器上强烈振荡。制备血浆标本需借助于抗凝剂，而血清标本只要待血清天然凝固、血块收缩后即可取得。也可在板孔中加入稀释液，再在其加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。可用作ELISA测定的标本十分广泛，体液(如血清 )、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体 或抗原成份，ELISA试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保留。

 血清标本可按常规方法采集，应留意避免溶血，红细胞溶解时会开释出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA试剂盒测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。如在冰箱中保留过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA试剂盒中可使本底加深。本文将叙述板式ELISA试剂盒各个操纵步骤的留意要点，珠式、管式及磁性球ELISA试剂盒，国外试剂均与特殊仪器配合应用，严格遵照划定操纵，必能得出正确的结果。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并留意不可溅出，不可产气愤泡。有此测定需用稀的血清，可在试管中按划定的稀释度稀释后再加样。 

AKAP12    丝氨酸抑制蛋白激酶C底物抗体
Alpha-Synuclein    核突触蛋白α抗体
APG4B    自噬相关蛋白4B抗体
ADAMTS12    整合素样金属蛋白酶与凝血酶1型-12抗体
alpha Actinin 4-Loading Control    α-辅肌动蛋白4(内参)抗体
Alkaline Phosphatase    碱性磷酸酶抗体
AU1 tag    AU1 tag标签抗体
AEBP1    脂肪细胞增强结合蛋白1
AKT1    蛋白激酶B
AKT1    蛋白激酶B
ANGL2    血管生成素样蛋白2抗体
Angiopoietin 4    血管生成素3/血管生成素4抗体
Annexin I    膜粘连蛋白 I抗体
Annexin A2    膜粘连蛋白 Ⅱ抗体

ELISA试剂盒