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干细胞培养传统方法
点击次数:674 更新时间:2015-08-06

人类干细胞通常是在一层饲养细胞上培养的,据认为,这可为细胞提供必需的营养物质,并有助于防止细胞分化。zui近,一项新的研究对这种根深蒂固的做法提出了挑战。

*,干细胞是很难维持和培养。像所有的真核细胞一样,它们对养分的有效性、pH值、温度、氧气和二氧化碳的含量都很敏感,而且它们也易于分化,留给研究人员的细胞不同于他们打算在实验中使用的细胞。

在早期,研究人员发现,在小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)层的顶部培养干细胞,可阻碍分化并有助于维持干细胞的健康。但是MEF特别不容易维持自我。从那时起,研究人员和生物技术公司已经开发出其他有效的饲养层细胞系,可提供干细胞培养方面的优势,以及与干细胞之间更有利的相互作用,无饲养细胞的方法也已经变得可用。但是,干细胞培养通常仍然需要研究人员成功地维持两种类型的细胞,并且,无饲养层细胞的方法要求高水平的细胞接种密度、专业的媒质和生长补充剂,从而使得它们非常昂贵。

zui近,一项新研究,对长期持有的观念——饲养细胞为干细胞生长提供必要的营养物质并防止细胞分化,提出了一些质疑。

为了调查饲养层细胞在干细胞培养中的作用,研究小组根据标准培养程序需要,制备了人成纤维细胞培养物,但是在添加干细胞之前,他们用戊二醛或甲醛固定成纤维细胞。这会使细胞层的拓扑结构稳定,但会杀死细胞。去除固定剂之后,他们把人类诱导多能干细胞(hiPSC)分层堆放在死亡的饲养层细胞上。

他们发现,hiPSC不仅粘附并生长为健康的培养集落,而且它们也持续表达多能性标志,从而表明分化也被阻断。这些细胞也在体内形成具有所有三个胚层的畸胎瘤,这是干细胞的一个定义性特征。

由于死亡的饲养层细胞不能给干细胞提供营养,因此这些结果表明,它们在干细胞培养中发挥的作用,并不像预期的那么重要。假设,饲养细胞层的拓扑结构,可能在两种细胞类型之间的关系当中,扮演zui重要的角色。

这让我觉得,我们可以用一种纳米方法来培养干细胞。我们可以用3D打印技术,模仿饲养层细胞的微毫米拓扑(nanotopology),并在未来*不使用饲养细胞。

即使在开发出模仿饲养层形状的培养基之前,这些发现仍然可以降低成本、劳动力,并简化干细胞培养技术。因为在这个过程中饲养层细胞不需要保持活力,我们可以将它们储存在室温,并花更少的时间培养它们。

联系人:王经理
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