本实验的目的是学会各种蛋白质含量的测定方法。了解各种测定方法的基本原理和优缺点。
    目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法，双缩尿法(Biuret法)、Folin－酚试剂法(Lowry法)和紫外吸收法。另外还有一种近十年才普遍使用起来的新的测定法，即考马斯亮蓝法(Bradford法)。其中Bradford法和Lowry法灵敏度zui高，比紫外吸收法灵敏10～20倍，比Biuret法灵敏100倍以上。定氮法虽然比较复杂，但较准确，往往以定氮法测定的蛋白质作为其他方法的标准蛋白质。
值得注意的是，这后四种方法并不能在任何条件下适用于任何形式的蛋白质，因为一种蛋白质溶液用这四种方法测定，有可能得出四种不同的结果。每种测定法都不是无缺的，都有其优缺点。在选择方法时应考虑：①实验对测定所要求的灵敏度和度；②蛋白质的性质；③溶液中存在的干扰物质；④测定所要花费的时间。
考马斯亮蓝法(Bradford法)，由于其突出的优点，正得到越来越广泛的应用。
一、微量凯氏(Kjeldahl)定氮法
样品与浓硫 酸共热。含氮有机物即分解产生氨(消化)，氨又与硫 酸作用，变成硫 酸氨。

二、双缩脲法(Biuret法)
(一)实验原理
双缩脲(NH3CONHCONH3)是两 个分子脲经180℃左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。

操作方法：
1. 标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲试剂。充分摇匀后，在室温(20~25℃)下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的*支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横座标，光吸收值为纵座标绘制标准曲线。
2、样品的测定：取2~3个试管，用上述同样的方法，测定未知样品的蛋白质浓度。注意样品浓度不要超过10mg/ml。