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人补体C4ELISA试剂盒的洗涤方法
点击次数:758 更新时间:2014-07-11

人补体C4ELISA试剂盒的洗涤方法

   TXB2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知TXB2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将TXB2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中TXB2的浓度呈比例关系。

操作步骤
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。

2555-0.2mlNSBP1(Nucleosome-binding protein 1) 核小体结合蛋白1抗体0.2ml
2556-0.2mlNSE (neuron specific enolase) 神经元特异性烯醇化酶抗体0.2ml
2557-0.1mlNT-3 神经营养因子-3抗体0.1ml
2557-0.2mlNT-3 神经营养因子-3抗体0.2ml
2558-0.2mlNT-4/NT-5(Neurotrophic factor 4/5) 神经生长因子4/5抗体0.2ml
2559-0.2mlNTCP(Na+/taurocholate Cotransporting Polypeptide) 钠离子/牛磺胆酸共转运蛋白0.2ml
2560-0.2mlNTN(Neurturin ) 神经生长因子抗体0.2ml
2561-0.2mlNtn1(Netrin-1) 轴突导向因子1抗体0.2ml
2562-0.2mlNurr1 核受体相关因子-1抗体0.2ml
2563-0.1mlOAS1(2',5'-oligoadenylate synthetase 1) 寡腺苷酸合成酶-10.1ml
Y1079-0.1mlGoat anti-human Fibrinogen/Cy3 荧光素Cy3标记羊

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