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博湖试剂-细菌总蛋白和膜蛋说明书
点击次数:772 更新时间:2014-06-12

                      细菌总蛋白和膜蛋

    在这项研究中,研究人员采用了一种具有疏蛋白(protein-repellent)性的柔性聚合物,并以一种可结合蛋白材料作为聚合物的盒状支撑点,通过激光直刻法(Direct  Laser  Writing  Method)制作出一种特殊的聚合物支架。这种支架的疏蛋白结构由25微米高的支柱组成,各个支柱之间通过细棒连接,连接点高度不一,然后盒状支撑点被地放在细棒中间。当含有粘附蛋白的溶液浸入支架时,蛋白只会与盒状支撑点相结合,两小时内,个体细胞占满支架,且只粘附在特定位点。由此,通过改变支撑点和细棒的位置,可实现对细胞形状的三维控制

6、DAB:

6.1 ZLI-9032/9033 DAB Kit:
使用前只需将试剂盒提供的A、B、C三种试剂各一滴加至1ml双蒸水中,即可获得1ml DAB工作液,简单易用。

6.1 ZLI-9030 DAB:
6mgDAB溶于10mlTBS(0.05M  pH7.6),再加入0.1ml浓度为3%的H2O2,过滤掉沉淀物,即可。

7、AEC:
4mg AEC溶于1ml二甲基甲酰胺中,加入14ml浓度为0.1M的醋酸缓冲液(pH5.2),然后加入0.15ml 3%H2O2,过滤掉沉淀物。

8、RIPA:
1×PBS,1%NP 40,0.5 sodium deoxycholate,0.1% SDS(此液体可长期保存)。以下抑制剂以储存液方式保存,临用前加入RIPA中。

8.1 10mg/ml PMSF异丙醇溶液(用量为10 l/ml)

8.2 Aprotinin(Sigma产品,用量为30 l/ml)

8.3 1000mM sodium orthovanadate冷冻液
(用量为10 l/ml)

9、Blotto A:
常规使用1×PBS,5% milk,0.05% Tween 20。

10、Blotto B:
与Phosphotyrosine抗体共用,1×PBS,1% milk,0.05% Tween 20。部分实验中milk可*去除,但可能引起背景增高。

 

联系人:王经理
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