巨细胞病毒抗体IgG(CMVAb-IgG)检测
 
    [测定方法]  ELISA法
    [方法学原理]  在微孔表面包被纯化的巨细胞病毒抗原。被稀释过的患者血清加入微孔中。如存在巨细胞病毒抗体-IgG可与微孔上抗原相结合。然后洗去未结合物质，再加入酶联液，与抗原抗体复合物结合。洗去过量的酶联液。zui后加入底物和色原(显色液)。在特定时间终止酶联液的催化反应。所产生的颜色强度与标本中巨细胞病毒抗体-IgG含量呈正相关。通过酶标仪与校正和对照相比，读出结果。
    [标本准备]  静脉抽血2ml，不抗凝。
    [试剂]
    1．微孔板
    2．样品稀释液
    3．HRP-抗人IgG酶结合物
    4．阴性对照
    5．阳性对照
    6．洗涤剂
    7．TMB显色液
    8．终止液
    [仪器设备]  酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。
    [测定步骤]
    1．吸取5u1血清标本加入250gl标本稀释液中，做1：51稀释。
    2。吸取l00ull稀释过的血清、阳性对照、阴性对照和校正液(不稀释)，加人微孔板内，设空白对照l孔。振荡，混匀，去除孔内液体中气泡，室温环境中孵育20min。
    3，弃去孔内液体，用洗涤液洗5次。
    4。每孔再加入100gl酶联结合物，室温环境中孵育20min。
    5。弃去孔中酶联液，用洗涤液洗5次。
    6，每孔加入100ul TMB显色液，室温环境中孵育10min。
    ?。每孔加入100ul终止液，终止反应，充分混匀。
    8。用酶标仪(波长为450nm)读取吸光度。以待测样本吸光度大于校正液孔吸光度为阳性。
    [注意事项]
    1．整个检测过程应符合实验室质量手册和生物安全守则规定，严防交叉污染。
    2．所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按传染物处理。
    3．试剂应保存于2～8℃冰箱，使用前应在室温环境中平衡30min。
    4．洗涤时各孔均应加满洗涤液，防止孔内有游离酶未洗净，每次洗板后均应在吸水纸上拍干。
    5．血标本应分离出血清保存，2～8℃可保存?d，冷冻保存可至6个月，避免反复冻融。
    6．试剂在储存或使用过程中，禁止过热、曝晒或强光。