在ELISA（酶联免疫吸附实验）中，加入底物（如TMB）后，辣根过氧化物酶（HRP）会催化其显色，颜色深浅与目标物浓度成正比。为确保读数时间点一致，必须在显色达到预期程度时立即终止反应。终止液通常为强酸（如2mol/L H₂SO₄），通过破坏酶活性实现快速终止。

若在大鼠样本检测中漏加终止液，反应将持续进行，导致吸光度（OD值）随时间不断升高，且不同孔因加样顺序差异而显色时间不一，严重影响数据可靠性。

漏加终止液的具体影响

1、OD值异常升高：未终止的酶反应会使底物持续转化，导致颜色加深，测得的OD值高于真实值。

2、孔间偏差加大：先加底物的孔反应时间更长，颜色更深，造成同一板内孔间差异显著，降低重复性。

3、zui大吸收波长偏移：TMB显色后呈蓝色，zui大吸收峰在~370nm；加入终止液转为黄色后，才在450nm处有zui强吸收。若不加终止液，使用450nm读数将偏离峰值，灵敏度下降，无法准确反映浓度变化。

4、标准曲线失准：标准品与样本反应时间不一致，导致拟合曲线偏离，样本浓度计算错误。

以下表格总结了关键影响：

建议

立即补救：若发现漏加，应尽快补加终止液并立即读数，记录延迟时间，评估数据可用性。

严格操作流程：使用检查清单或双人核对制度，避免遗漏关键步骤。

设置对照：每次实验包含空白对照和阳性对照，有助于识别异常情况。

培训规范：对新手进行标准化操作培训，强调终止液的关键作用。