如何定期检查ELISA试剂的活性?
点击次数:0 更新时间:2025-11-19
ELISA试剂在使用过程中,其活性可能会因储存条件、运输环境或使用频率等因素发生变化。因此,定期检查试剂的活性对于确保实验数据的准确性至关重要。试剂活性的下降可能导致假阴性或灵敏度降低,影响实验结果。
以下是一些常用的ELISA试剂活性检查方法:
一、试剂保存与检查
温度监控:确保试剂保存在2-8℃的稳定环境中,避免靠近冰箱出风口或温度波动区域。
有效期管理:记录试剂到货日期,临近有效期时需提前进行活性验证。
分装与标记:酶标记物等易失活试剂应分装冻存,并标注分装日期。
二、活性验证方法
1、标准品检测
每月用标准样品检测试剂盒的灵敏度(如检测限)和线性范围,确保标准曲线R²≥0.99。
若OD值异常(如最高浓度孔OD值<1.0或空白孔OD值>0.2),需重新评估试剂活性。
2、质控品测试
使用质控品(低、中、高浓度)验证批内和批间精密度,要求批内CV<10%,批间CV<15%。
质控品需充分混匀,避免反复冻融导致蛋白变性。
3、交叉验证
对比新旧批次试剂的检测结果,若差异超过20%,需暂停使用并联系供应商。
三、记录与维护
建立试剂档案:记录试剂批号、保存位置、检测日期及结果,便于追踪问题。
仪器校准:定期校验移液器、酶标仪等设备,确保加样和读数准确。
通过以上措施,可有效监控ELISA试剂的活性,避免因试剂失效导致的数据偏差。
