设为主页 加入收藏 联系我们

公司公告

更多公告>>
技术文章
当前位置:首页 > 技术文章 > PCR样品预处理的具体流程
PCR样品预处理的具体流程
点击次数:7 更新时间:2025-06-24

聚合酶链式反应(PCR)样品作为分子生物学研究的核心材料,其质量直接决定着实验数据的可靠性与重复性。在进行PCR样品预处理时,需要遵循严格的流程以确保实验结果满意。以下是PCR样品预处理的具体流程

1. 样品准备区:这个区域专门用于样品的准备,包括DNARNA的提取。

2. 避免在该区域操作PCR产物和带有目标序列的DNA克隆。

3. 组织培养物、组织标本和血清样品在这里进行处理以提取DNARNA

4. 使用专门的工具和移液管,避免交叉污染,大体积样品用无菌一次性移液管吸取。

5. 所有操作中要戴实验服和手套,并频繁更换手套,尤其是在抽提过程中。

6. 实验服需专门用于样品准备区并经常清洗。

7. RNAPCR的额外步骤:在处理RNA样本时,需特别注意防止污染,反转录一步可以在样品准备区进行。UNG技术也可用于防止污染。

8. PCR区:此区域用于准备各种反应,必须保持清洁且无污染。使用正压活塞式移液管,所有试剂都应高压灭菌并用0.22μm过滤水配制。

9. 试剂操作:确保所用溶液无核酸和核酸酶污染,试剂中加入适量叠氮钠以抑制微生物生长。试剂配制后分装保存,并使用一次性灭菌的瓶子和管子。

10. 建立PCR混合物:可以预先配制并分装保存“主混合物"以简化实验,同时设置阴性、弱阳性和强阳性对照来验证过程的效率和清洁度。

11. 污染控制:使用UNG酶或紫外线技术来减少污染,尤其是由PCR产物引起的污染。

12. PCR区:用于反应后的样品分析,此区域的试剂和仪器仅用于后PCR活动,不能用于前PCR步骤。

确保每个步骤都遵循无菌操作和隔离原则,以最大限度地减少污染风险,从而提高PCR实验的成功率和数据的可靠性。


联系人:王经理
点击这里给我发消息
电话:
86-021-57763112
手机:
18917018169

智慧城市网

推荐收藏该企业网站