PCR引物和测序引物不同点比较
点击次数:50 更新时间:2025-03-24
一、定义不同:
PCR是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火(复性)及适温延伸等反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。
测序引物分自带引物和通用引物,自带引物为客户自行设计的PCR扩增引物或者载体及目的片段上设计的引物进行测序。
二、作用不同:
通用引物一般在购买载体时公司提供,一般测序引物如T7、SP6、M13等测序公司免费使用。
不仅可用于基因分离、克隆和核酸序列分析等基础研究,还可用于疾病的诊断或任何有DNA,RNA的地方。PCR又称无细胞分子克隆或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。
三、适用不同:
PCR引物又称为寡核苷酸引物,也就是RNA,是由人工合成的,分为两种,引物1和引物2。由于DNA聚合酶只能从核苷酸链的5'端到3'端进行复制,也就是只能识别3'的尾端。
测序必须为特异性引物,不能为随机、兼并、不纯、带荧光标记、长度过长引物.测序引物长度一般要求在18-25BP,最长不超过30BP..PCR引物要求相对低一些.简单说来就是PCR引物可以用来扩增但是不一定适合测序。