实时荧光定量PCR检测内容简述
点击次数:141 发布时间:2023-05-23
实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative PCR),是指在PCR反应体系中加入荧光基因,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
荧光定量PCR以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具,目前已得到广泛应用(如转基因动植物检测、RNAi基因失活率检测、病原微生物或病毒含量检测、基因差异表达、基因分型)。
qPCR检测内容:
1、 根据目的基因设计引物及引物合成
2、RNA抽提+逆转录
3、 RNA定量及质量分析
4、使用荧光染料SYBR Green法进行实时定量PCR(重复三次)
5、 数据处理