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大鼠活化素AELISA试剂盒操作步骤
点击次数:113 发布时间:2022-06-28

大鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒操作步骤:

1. 取出试剂盒,室温(20-25℃)放置 30 分钟。

2. 分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准 品组(6 个浓度)、空白孔、待测样品组。 注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。

3. 加样:依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水;其余微孔中加入 50ul 的待测样本。

4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。

5. 温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。

6. 洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置 15-30s,充分清洗酶标板 5 次,用吸水纸彻底拍干。

7. 显色:各孔加入显色剂 A 液 50ul 后,再加入显色剂 B 液 50ul。

8. 终止:25-37℃下避光反应 10-15 分钟,加入 50ul 终止液。 9. 读板:在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。 注:读板时必须拭干板底残留的液体和手指痕迹,读板时间控制在终止反应后的 30 分钟内,以免影响准确性。



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