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动物组织总蛋白提取
点击次数：829 更新时间：2021-12-22
变性总蛋白提取（SD-001）
以下步骤是从 15-20 mg 组织中提取，对于昆虫组织，例如果蝇，使用 15-20 个幼虫，蛹或成虫样本。如果起始量较大或者较小，需调整相应裂解液的用量比例。
1. 将离心管柱及接收管套管放在冰上预冷
2. 将 15-20 mg 组织放置于离心管柱上，用塑料棍扭转研磨 50-60 次，加入 200ul 细胞裂解液，继续研磨 30-60 次。(组织用量不要过量，无需过度研磨，裂解液可分两次加入以得到最佳效果)注意：塑料研磨棒可以重复使用，用蒸馏水*冲洗干净，用纸巾擦干。
3. 盖上盖子室温孵育 1-2 分钟，14000-16000rpm 离心 1-2 分钟取出。
4. 立刻将收集管放置于冰上，弃去离心管柱，蛋白提取完成可应用于下游实验。
请注意：部分未*裂解的组织不会影响样品质量。
天然总蛋白提取（SN-002）
1. 将天然细胞裂解液(SN-002)，离心管柱及接收管套管放在冰上预冷。
2. 将 15-20 mg 组织放置于离心管柱上，用塑料棍扭转研磨 50-60 次，加入 200ul 天然细胞裂解液(SN-002)，继续研磨 30-60 次。(组织用量不要过量，无需过度研磨，裂解液可分两次加入以得到最佳效果)。注意：塑料研磨棒可以重复使用，用蒸馏水*冲洗干净，用纸巾擦干。
3. 开盖冰上孵育 5 分钟，盖上盖子，4℃，14000-16000rpm 离心 1-2 分钟取出。
4. 立刻将收集管放置于冰上，弃去离心管柱，蛋白提取完成可应用于下游实验。
