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ELISA样本收集要点与处理方法
点击次数:459 更新时间:2021-10-26
  做ELISA实验,在处理样本前应该先了解收集样本的注意事项。
 
  样本收集注意事项:
 
  1.收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
 
  2.血清和血浆避免使用溶血,高血脂标本。
 
  3.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
 
  4.标本收集后若不及时检测,需按一次使用量分装,冻存于-20℃,-80℃电冰箱内,避免反复冻融。
 
  5.可根据标本的实际情况,做适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数) 。
 
  6.收集标本,尽量做到双份的用量,避免一次实验失败,重复实验时标本缺失,从而耽误实验进程。
 
  7.收集标本时,应该做好防护措施(比如戴手套,口罩,护目镜等),认为所有标本都具有一定的潜在危险性。
 
  8.样本处理应该在生物安全柜里面,并且正确使用生物安全柜。
 
  样本正确的处理方法:
 
  1.血清:将采集的全血静置冰箱4℃过夜,然后1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。
 
  2.血浆:用EDTA,枸橼酸钠,肝素等作为抗凝剂,加入血液混匀后,1000-3000rpm离
 
  心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)
 
  保存。
 
  3.组织匀浆:切取组织块,0.01MPBS中过洗一次;按照1G组织加入5-10ml组织蛋白萃取试剂的比例,在冰水中匀浆。匀浆完成后,5000-10000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。
 
  4.细胞培养上清:1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。
 
  5.尿液,腹水,脑脊液等:1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃3-6个月)保存。
 
  注:样品稀释的一般原则
 
  用户须查阅相关文献了解标本内待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的最佳检测范围。样品的稀释应有详细记录。
 
联系人:王经理
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