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ELISA实验中的小技巧总结
点击次数:111 发布时间:2021-08-18
  ELISA实验中的小技巧总结:
 
  1.切记在加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。
 
  2.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。
 
  3.在吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
 
  4.务必做双孔实验,这样才既能保证数据的准确性,又能反映出试剂盒的精密度。
 
  5.样品稀释液应用加液器加注,并经常校对其准确性。
 
  6.为防止样品蒸发,试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内,酶标板加上盖或覆膜。
 
  7.未使用完的酶标板或者试剂,请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。
 
  8.ELISA试剂盒实验中,加样后及时放人孵箱,标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。
 
  9.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟,或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。
 
  10.人ELISA试剂盒洗涤时各孔均需加满液体,防止孔口有游离酶不能洗净。
 
  11.每次实验留一孔作为空白调零孔,该孔不加任何试剂,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。测量时先用此孔调OD值至零。
 
  12.手工洗板时每次加入洗涤液后。应静置15~30s,不要将一个酶标孑L中的洗涤液溅入另一酶标孔中,防止交叉污染。甩去洗涤液后将酶标板放在毛巾或吸水纸上拍干。
 
  13.对样本的结果有疑问时需要使用其他检测方法进行验证。
 
  14.没有去离子水或双蒸水时,可以使用娃哈哈纯净水配制溶液,切勿使用自来水。
 
  15.在使用微量加样器时,吸取不同瓶子中液体后要更换枪头,即使吸取标准品溶液。
 
  16.吸取液体时速度不易太快,以免产生气泡,人ELISA试剂盒吸取的量不够准确。
 
  17.吸取液体时要选用量程和需要量接近的微量加样器吸,减少误差。
 
联系人:王经理
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