植物维生素D3（VD3）ELISA试剂盒

操作步骤：各试剂在使用前平衡至室温。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。除空白孔外，余孔分别加标准溶液或待测样品100ul，注意不要有气泡，轻轻混匀，酶标板加上盖，37℃反应120分钟。
2. 弃去液体，甩干，不用洗涤。
3. 每孔加检测溶液A工作液 100ul，37℃,60分钟。洗板3次，350ul/每孔，甩干。
4. 每孔加检测溶液B工作液 100ul，37℃，60分钟，洗板5次，甩干。
5. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光显色30分钟(此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显)。
6. 依序每孔加终止溶液50ul，终止反应(此时兰色立转黄色)。用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

洗板方法：
手工洗板方法：吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体；在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次；将推荐的洗涤缓冲液至少0.4ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
自动洗板：如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。