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ELISA试剂盒样品制备的浓度问题分析
点击次数:819 更新时间:2018-09-03
ELISA试剂盒样品制备的浓度问题分析
1.合适的浓度;
2.保证检测体系和实际体系的一致性,包括:pH、系统的总离子浓度、存在的任何表面活性剂或聚合物的浓度。
我们今天来看看合适的浓度因素,它包括低浓度和浓度。
低浓度:
在zeta电位仪测试过程中所需的小光强为20 kcps。因此低浓度取决于相对折光指数差(粒子和溶剂间的折光指数差值)和粒子尺寸。
粒子的尺寸越大所产生的散射光越强,所需的浓度也就越低。对于折光指数差较大的样品,譬如TiO2粒子的水性悬浮液,TiO2的折光指数为2.5,与水的折光指数差较大,有较强的散射能力。因此对于300 nm的TiO2粒子,小浓度可以为10-6 w/v%。对于折光指数差很小的样品,比如蛋白质溶液,低浓度会高很多。通常低浓度需要在0.1-1 w/v%之间才能有足够的散射光强进行Zeta电位测量。终,对于特定样品进行一个成功的Zeta电位测量的低浓度,应该由试验实际测量得到。
浓度:
zeta电位仪测量过程中的散射光在向前的角度收集,因此激光应该保证能够穿过样品。如果样品的浓度过高,则激光将会由于样品的散射衰减很多,相应的降低检测到的散射光光强。为了补偿此影响,衰减器会让更过的激光通过。终,样品的浓度范围必须由测定不同浓度下的Zeta电位的试验决定,由此来得到浓度对Zeta电位的影响。
为了确保数据的可用性,一定要尽量保证检测体系和实际应用体系的统一性。并通过测试不同条件下Zeta电位的变化,直到Zeta电位不明显受参数变化的影响时,这个参数所在区间为可用。
