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elisa测定试剂盒样本的影响
1、样本的保存:在冰箱中保存过久的标本,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、会造成假阳性;为避免上述问题,在ELISA试剂盒测定血清标本时能新鲜采集;如果不能立即测定,根据相应的时间保存相应的温度,5 d内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应-20℃低温冻存;如冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。
2、样本的时间:因为塑料试管能吸附抗原物质,所以样本长时间放在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。的方法是使用真空采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。
3、样本受细菌污染:因菌体中可能会含有内源性辣根过氧化物酶,因此,被细菌污染的标本同溶血标本一样,可能会产生非特异性显色而干扰测定结果。
4、样本的凝固:样本凝固不全。在实验中,有的时候心急为了争取时间快速检测,ELISA试剂盒在血液还未开始凝固的时候就强行离心分离血清,导致血清中仍残留部分纤维蛋白原,在ELISA测定过程中形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;因此血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清。
5、样本溶血:溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),ELISA试剂盒在洗涤过程中往往难以*洗脱,它可使H2O2释放出原生态氧(O),从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,产生假阳性[2]。所以严重溶血标本禁用。
elisa测定试剂盒进口/国产 豚鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA Kit,48T/96T
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