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elisa测定试剂盒基本原理及注意事项
点击次数:652 更新时间:2018-04-27

elisa测定试剂盒基本原理及注意事项
⒈ 正式试验时,应别离以阳性对照与阴性对照操控试验条件,待检样品应作一式二份,以保证试验效果的性。有时本底较高,说明有非特异性反响,可选用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
⒉ 在ELISA中,进行各项试验条件的挑选是很首要的,其间包含:
⑴ 固相载体的挑选:很多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其办法可所以凹孔平板、试管、珠粒等。当时常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不论何种载体,在运用前均可进行挑选:用等量抗原包被,在同一试验条件下进行反响,查询其显色反响是不是均一性,据此判明其吸附功能是不是超卓。
⑵ 包被抗体(或抗原)的挑选:将抗体(或抗原)吸附在固相载体外表时,央求纯度要好,吸附时一般央求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时刻及其蛋白量也有必定影响,一般多选用4℃18~24小时。蛋白质包被的zui适浓度需进行滴定:即用不一样的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相一同,查询阳性标本的OD值。挑选OD值zui大而蛋白量zui少的浓度。对于大都蛋白质来说一般为1~10μg/ml。
⑶ ELISA试剂盒酶符号抗体作业浓度的挑选:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶符号抗体部份)。然后再固定其它条件或选用“方阵法"(包被物、待检样品的参看品及酶符号抗体别离为不一样的稀释度)在正式试验系统里地滴定其作业浓度。
⑷ 酶的底物及供氢体的挑选:对供氢体的挑选央求是价廉、安全、有明显地显色反响,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌效果,应留神防护。有条件者应运用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是当时较为满意的供氢体。底物效果一段时刻后,应参加强酸或强碱以间断反响。一般底物效果时刻,以10-30分钟为宜。底物运用液有必要新鲜,尤其是H2O2在临用前参加。①使抗原或抗体结合到某种固相载体外表,并坚持其免疫活性。
elisa测定试剂盒白细胞介素1β(IL-1B)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-1B ELISA Kit

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白细胞介素17(IL-17)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-17 ELISA Kit

白细胞介素16(IL-16)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-16 ELISA Kit

白细胞介素15(IL-15)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-15 ELISA Kit

白细胞介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-12/P70 ELISA Kit

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白细胞介素11(IL-11)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-11 ELISA Kit

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白介素1受体拮抗剂(IL-1RA)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-1RA ELISA Kit

白介素1β(IL-1B)ELISA试剂盒 ,英文名: IL-1B ELISA Kit

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