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elisa检测试剂盒说明书标准操作要点
点击次数:808 更新时间:2018-04-23

elisa检测试剂盒标准操作要点
的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的本公司要求使用的纯化水电导率小于1.5μs/cm。
1. 标本的采取和保存
大部分ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。一般说来,在5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。抗凝不*的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性,建议尽量不用抗凝血尤其是肝素抗凝剂。
2.加样
加样时应将所加物加在ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出。
3.保温
在建立ELISA 方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经
1-2 小时,产物的生成可达。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。由于公司的试剂盒温育是在空气浴中完成,采用水浴会造成值偏高或花板。另外温育中还有边缘效应,边上的值会偏高,建议为了客观的判断结果,将质控放在非边缘位置。
4.洗涤
洗涤在ELISA 过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒    ,英文名:    cGMP ELISA Kit    
大鼠环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒    ,英文名:    COX-2 ELISA Kit    
大鼠环加氧酶1(COX-1)ELISA试剂盒    ,英文名:    COX-1 ELISA Kit    
大鼠环孢素A(CsA)ELISA试剂盒    ,英文名:    CsA ELISA Kit    
大鼠花生四烯酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA试剂盒    ,英文名:    Alox5 ELISA Kit    
大鼠花生四烯酸(AA)ELISA试剂盒    ,英文名:    AA ELISA Kit    
大鼠红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒    ,英文名:    EPOR ELISA Kit    
大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒    ,英文名:    EPO ELISA Kit    
大鼠横纹肌辅肌动蛋白α(sm Actinin-α)ELISA试剂盒    ,英文名:    sm Actinin-α ELISA Kit    
大鼠黑色素细胞抗体(MC Ab)ELISA试剂盒    ,英文名:    MC Ab ELISA Kit    
大鼠核转录因子κBP65(NFκBp65)ELISA试剂盒    ,英文名:    NFκBp65 ELISA Kit    
大鼠核转录因子κB(NFκB)ELISA试剂盒    ,英文名:    NFκB ELISA Kit    
大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA试剂盒    ,英文名:    IKBα ELISA Kit    
大鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒    ,英文名:    NF-κB p65 ELISA Kit    
大鼠核因子κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒    ,英文名:    NF-κB p65 ELISA Kit   大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA试剂盒    ,英文名:    RANKL ELISA Kit    
大鼠核因子κB(NF-κB)ELISA试剂盒    ,英文名:    NF-κB ELISA Kit    
大鼠和肽素(copeptin)ELISA试剂盒    ,英文名:    copeptin ELISA Kit    
大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA试剂盒    ,英文名:    Tie-2 ELISA Kit    
大鼠含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶1(Tie-1)ELISA试剂盒    ,英文名:    Tie-1 ELISA Kit    
大鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)ELISA试剂盒    ,英文名:    LPO ELISA Kit    
大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA试剂盒    ,英文名:    PPAR-γ ELISA Kit    

 

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