elisa检测试剂盒标准操作要点
的试剂,良好的仪器和正确的操作是保证ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。ELISA 中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的本公司要求使用的纯化水电导率小于1.5μs/cm。
1. 标本的采取和保存
大部分ELISA 检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的ELISA 测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。一般说来,在5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。抗凝不*的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性,建议尽量不用抗凝血尤其是肝素抗凝剂。
2.加样
加样时应将所加物加在ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出。
3.保温
在建立ELISA 方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经
1-2 小时,产物的生成可达。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。由于公司的试剂盒温育是在空气浴中完成,采用水浴会造成值偏高或花板。另外温育中还有边缘效应,边上的值会偏高,建议为了客观的判断结果,将质控放在非边缘位置。
4.洗涤
洗涤在ELISA 过程中虽不是一个反应步骤,但却决定着实验的成败。ELSIA 就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中,洗涤是zui主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。
elisa检测试剂盒含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)ELISA试剂盒 ,英文名: vWA1 ELISA Kit
含溴区PHD指蛋白1(BRPF1)ELISA试剂盒 ,英文名: BRPF1 ELISA Kit
含锌飘带域蛋白1(ZNRD1)ELISA试剂盒 ,英文名: ZNRD1 ELISA Kit
含缬酪肽蛋白(VCP)ELISA试剂盒 ,英文名: VCP ELISA Kit
含钯蛋白(PALLD)ELISA试剂盒 ,英文名: PALLD ELISA Kit
含卵巢癌免疫反应抗原域蛋白2(OCIAD2)ELISA试剂盒 ,英文名: OCIAD2 ELISA Kit
含亮氨酸丰富重复蛋白3C(LRRC3C)ELISA试剂盒 ,英文名: LRRC3C ELISA Kit
含卷曲螺旋域蛋白80(CCDC80)ELISA试剂盒 ,英文名: CCDC80 ELISA Kit
含卷曲螺旋域蛋白3(CCDC3)ELISA试剂盒 ,英文名: CCDC3 ELISA Kit
含卷曲螺旋C2域蛋白1A(CC2D1A)ELISA试剂盒 ,英文名: CC2D1A ELISA Kit
含胶原三螺旋重复蛋白1(CTHRC1)ELISA试剂盒 ,英文名: CTHRC1 ELISA Kit
含碱性螺旋环螺旋域蛋白B8(BHLHB8)ELISA试剂盒 ,英文名: BHLHB8 ELISA Kit
含杆状病毒IAP重复蛋白6(BIRC6)ELISA试剂盒 ,英文名: BIRC6 ELISA Kit
含钙通道Flower域蛋白(CACFD1)ELISA试剂盒 ,英文名: CACFD1 ELISA Kit
含动力蛋白重链域蛋白1(DNHD1)ELISA试剂盒 ,英文名: DNHD1 ELISA Kit
含V-Set域T细胞激活抑制因子1(VTCN1)ELISA试剂盒 ,英文名: VTCN1 ELISA Kit
含V-Set免疫球蛋白域蛋白2(VSIG2)ELISA试剂盒 ,英文名: VSIG2 ELISA Kit
含Toll白细胞介素1受体域衔接蛋白(TIRAP)ELISA试剂盒 ,英文名: TIRAP ELISA Kit
含TCP1伴侣蛋白亚基2(CCT2)ELISA试剂盒 ,英文名: CCT2 ELISA Kit
含SET域蛋白7(SETD7)ELISA试剂盒 ,英文名: SETD7 ELISA Kit
含RUN域半胱氨酸丰富域苄氯素1相互作用蛋白(Rubicon)ELISA试剂盒 ,英文名: Rubicon ELISA Kit
含RNA结合冷休克域蛋白E1(CSDE1)ELISA试剂盒 ,英文名: CSDE1 ELISA Kit
含Rho关联卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock2)ELISA试剂盒 ,英文名: Rock2 ELISA Kit
含RCC1和BTB域蛋白2(RCBTB2)ELISA试剂盒 ,英文名: RCBTB2 ELISA Kit
含PR域蛋白10(PRDM10)ELISA试剂盒 ,英文名: PRDM10 ELISA Kit
含MOCO硫化酶羧基端域蛋白1(MOSC1)ELISA试剂盒 ,英文名: MOSC1 ELISA Kit
含MANSC域蛋白1(MANSC1)ELISA试剂盒 ,英文名: MANSC1 ELISA Kit
含Kazal型丝氨酸蛋白酶抑制剂域蛋白1(KAZALD1)ELISA试剂盒 ,英文名: KAZALD1 ELISA Kit
含FYVE域锌指蛋白27(ZFYVE27)ELISA试剂盒 ,英文名: ZFYVE27 ELISA Kit
含FYVE域锌指蛋白26(ZFYVE26)ELISA试剂盒 ,英文名: ZFYVE26 ELISA Kit
含FYVE域锌指蛋白16(ZFYVE16)ELISA试剂盒 ,英文名: ZFYVE16 ELISA Kit
含CUB域蛋白1(CDCP1)ELISA试剂盒 ,英文名: CDCP1 ELISA Kitelisa检测试剂盒