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elisa检测试剂盒主要的操作要点
点击次数:537 更新时间:2018-01-03

elisa检测试剂盒主要的操作要点
1.试剂的准备
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
 2.标本的采取和保存
可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液、分泌物和排泄物)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂
3.保温
在ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。
ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有zui贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
elisa检测试剂盒干扰素α/β受体2(IFNα/βR2)ELISA试剂盒    ,英文名:    IFNα/βR2 ELISA Kit
干扰素α/β受体(IFNα/βR1)ELISA试剂盒    ,英文名:    IFNα/βR1 ELISA Kit
干扰素α(IFNα)ELISA试剂盒    ,英文名:    IFNα ELISA Kit
肝脂酶(LIPC)ELISA试剂盒    ,英文名:    LIPC ELISA Kit
肝脏磷酸果糖激酶(PFKL)ELISA试剂盒    ,英文名:    PFKL ELISA Kit
肝型脂肪酸结合蛋白(FABP1)ELISA试剂盒    ,英文名:    FABP1 ELISA Kit
肝细胞生长因子受体(HGFR)ELISA试剂盒    ,英文名:    HGFR ELISA Kit
肝细胞癌相关蛋白1(HCRP1)ELISA试剂盒    ,英文名:    HCRP1 ELISA Kit
肝素酶2(HPA2)ELISA试剂盒    ,英文名:    HPA2 ELISA Kit
肝素酶(HPA)ELISA试剂盒    ,英文名:    HPA ELISA Kit
肝素结合性表皮生长因子(HBEGF)ELISA试剂盒    ,英文名:    HBEGF ELISA Kit
肝受体同源物1(LRH1)ELISA试剂盒    ,英文名:    LRH1 ELISA Kit
肝肾骨碱性磷酸酶(ALPL)ELISA试剂盒    ,英文名:    ALPL ELISA Kit
肝配蛋白B3(EFNB3)ELISA试剂盒    ,英文名:    EFNB3 ELISA Kit
肝配蛋白B2(EFNB2)ELISA试剂盒    ,英文名:    EFNB2 ELISA Kit
肝配蛋白B1(EFNB1)ELISA试剂盒    ,英文名:    EFNB1 ELISA Kit
肝配蛋白A受体3(EPHA3)ELISA试剂盒    ,英文名:    EPHA3 ELISA Kit
肝配蛋白A受体10(EPHA10)ELISA试剂盒    ,英文名:    EPHA10 ELISA Kit
肝配蛋白A受体1(EPHA1)ELISA试剂盒    ,英文名:    EPHA1 ELISA Kit
肝配蛋白A5(EFNA5)ELISA试剂盒    ,英文名:    EFNA5 ELISA Kit
肝配蛋白A4(EFNA4)ELISA试剂盒    ,英文名:    EFNA4 ELISA Kit
肝配蛋白A3(EFNA3)ELISA试剂盒    ,英文名:    EFNA3 ELISA Kit
肝配蛋白A2(EFNA2)ELISA试剂盒    ,英文名:    EFNA2 ELISA Kit
肝配蛋白A1(EFNA1)ELISA试剂盒    ,英文名:    EFNA1 ELISA Kit
肝胶原凝集素1(CLL1)ELISA试剂盒    ,英文名:    CLL1 ELISA Kit
肝肠钙黏蛋白(CDH17)ELISA试剂盒    ,英文名:    CDH17 ELISA Kit
肝癌源性生长因子(HDGF)ELISA试剂盒    ,英文名:    HDGF ELISA Kit
甘油酸激酶(GLYCTK)ELISA试剂盒    ,英文名:    GLYCTK ELISA Kit
甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA试剂盒    ,英文名:    GAPDH ELISA Kit
甘油磷酸肌醇锚定高密度脂蛋白结合蛋白1(GPIHBP1)ELISA试剂盒    ,英文名:    GPIHBP1 ELISA Kit
甘油磷酸二酯磷酸二酯酶1(GDE1)ELISA试剂盒    ,英文名:    GDE1 ELISA Kit
甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶(GPCPD1)ELISA试剂盒    ,英文名:    GPCPD1 ELISA Kit
甘油磷酸-O-酰基转移酶(GNPAT)ELISA试剂盒    ,英文名:    GNPAT ELISA Kit
甘油激酶5(GK5)ELISA试剂盒    ,英文名:    GK5 ELISA Kit
甘油激酶2(GK2)ELISA试剂盒    ,英文名:    GK2 ELISA Kit
甘油激酶(GK)ELISA试剂盒    ,英文名:    GK ELISA Kit
甘露糖受体C2(MRC2)ELISA试剂盒    ,英文名:    MRC2 ELISA Kit
甘露糖受体C1样蛋白1(MRC1)ELISA试剂盒    ,英文名:    MRC1 ELISA Kit
甘露糖受体C1(MRC1)ELISA试剂盒    ,英文名:    MRC1 ELISA Kit
甘露糖磷酸异构酶(MPI)ELISA试剂盒    ,英文名:    MPI ELISA Kit
甘露糖结合凝集素2(LMAN2)ELISA试剂盒    ,英文名:    LMAN2 ELISA Kitelisa检测试剂盒

 

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