我司收到一位同学的，主要是咨询ELISA检测试剂盒的洗涤参数，这一问题发送至我司技术部，技术部是这样回答的:
一、洗涤量
自动洗板机会分配洗涤液。如果你之前遭遇过高背景，那么不要犹豫，将洗涤量调为高，是比包被体积更高。太少的洗涤液会让一部分分析表面洗涤不到，从而明显增加背景。所有反应孔的洗涤量必须相同。ELISA板的商通常会在试剂盒的使用手册中列出包被量。行业中通常使用的包被量是200μl。如果你的试剂盒也是这样，那么商可能会建议使用300μl洗涤液进行洗涤，以便清洁整个反应孔的壁。一般来说，洗涤量越高，则孵育步骤残留的抗体或抗原量就越少。
二、洗涤循环的量
ELISA检测试剂盒洗涤次数越多，背景越低。然而，太多次的洗涤会降低信号强度，使其难以测定。通常的做法是在每次抗体或抗原孵育后重复洗涤三次。不过，ELISA板的商会对洗涤次数提出建议。一般而言，商包被平板需要的洗涤次数比用户包被的平板要少。对于用户包被的ELISA板，必须优化洗涤次数。
控制洗涤量和洗涤次数的另一种方法是加入过量的洗涤液。一般来说，96孔板的每个孔能容纳330至460μl。不过，有些自动化洗板机可设置程序，分配远远超出这个量的洗涤液，比如1ml。它是如何做到的呢？其实很简单，就是在分液的同时打开吸液功能。换句话说，随着分液器分配更多的液体，抽吸器也将液体吸出。这种技术能增加洗涤量，但不会溢出到其他孔中。
Thrombin Activation peptide fragment 1    凝血酶激活肽1抗体
Thrombin Activation peptide fragment 2    凝血酶激活肽2抗体
Tafazzin    Tafazzin蛋白抗体
TEC    TEC酪氨酸激酶蛋白抗体
TRPV6    钙转运蛋白1抗体
TIMP-2    金属蛋白酶组织抑制因子-2抗体
TNFRSF19    肿瘤坏死因子配体超家族成员19抗体
TNFSF9    肿瘤坏死因子配体超家族成员9抗体
Transaldolase 1    转醛醇酶抗体
TAF12    TATA框结合蛋白关联因子12抗体
Elongin B    转录延伸因子B2抗体
TG    兔抗甲状腺球蛋白
TNFAIP3    肿瘤坏死因子α诱导蛋白3抗体
TRPM2    瞬时受体电位离子通道蛋白/M亚家族抗体
TSSC3    肿瘤抑制转移候选基因3抗体
ELISA检测试剂盒