ELISA试剂盒本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛免疫球蛋白E（IgE）水平。用纯化的抗IgE抗体
包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入免疫球蛋白E，再与HRP标记的IgE
抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在
HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的
免疫球蛋白E（IgE）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲
线计算样品中牛免疫球蛋白E（IgE）的含量。

操作步骤
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上按序设标准品孔 10 孔，在*、第二孔中分别
加标准品 100μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液 50μl，混匀；再各取 100μl 分
别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl，混匀后，在第
三孔和第四孔中先各取50μl弃掉；再各取 50μl分别加到第五、第六孔中；再在第五、
第六孔中分别加标准品稀释液 50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取 50μl 分别加
到第七、第八孔中；再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl，混匀后从第七、
第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中；再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，
混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（ 稀释后各孔加样量都为50μl，浓 度分别为 240        μg/ml，160μg/ml ，80μg/ml，40μg/ml，20μg/ml）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样
品zui终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，轻轻晃动混匀。3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。     
4. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此
重复 5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同 3。
8. 洗涤：操作同 5。
9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl，再加入显色剂 B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15 分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止
液后 15分钟以内进行。

CEP76    中心体蛋白质76抗体
CEP152    中心体蛋白152抗体
Casein kinase 1 gamma 2    酪蛋白激酶1γ2/casein kinase Iγ1抗体
CLPTM1    唇裂和腭裂相关跨膜蛋白1抗体
CKLFH8    趋化素样因子超家族成员8抗体
CKLFH1    趋化素样因子超家族成员1抗体
CLN6    神经细胞蜡样质脂褐质沉积病蛋白CLN6抗体
CEP104    甘氨酸结合蛋白抗体
Calcyon    多巴胺D1受体相互作用蛋白抗体
Capicua    Capicua蛋白抗体
CA6    碳酸酐酶6抗体
Connexin 29    间隙连接蛋白29抗体
Connexin-29    间隙连接蛋白29抗体
CXCR7    细胞表面趋化因子受体7抗体
C1orf76    神经母细胞瘤源性分泌蛋白抗体
CHMP2B    染色质修饰蛋白2B抗ELISA试剂盒