一、 抗体的酶标记及质量鉴定
    ELISA试剂盒本试验采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上[1]，标记完后取上清用Sephedex G200 凝胶层析进行纯化，洗脱液为0.2mol/L pH7.4的PBS，流速为15ml/h，分步收集，每支3ml，以紫外分光光度计测A280吸光度值，以洗脱体积为横坐标，吸光值为纵坐标做图，收集*峰即为酶标抗体峰。标记完后用紫外分光光度计在分别在280nm、及403nm处测定酶标记物的A值，计算免疫球蛋白量、摩尔比值、酶结合率以及标记率。
二、包被用缓冲液及zui适包被抗原浓度的优化
1、包被缓冲液的优化
   ELISA试剂盒包被抗原时，为了得到*的包被效果，我们采用了碳酸盐缓冲液（50mM ph9.6 ）、磷酸盐缓冲液（50mM ph7.6）、以及TRIS盐酸缓冲液（50 mM ph7.6）三种缓冲液作为包被液，抗原包被浓度为5ug/ml，及2.5ug/ml,酶标抗体工作浓度为1：400及1：300，用自动酶标仪分析，选择*的包被缓冲液系统。同时为了保证缓冲液能够长期保存，我们在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作为防腐剂。
2、zui适抗原包被浓度的优化
   ELISA试剂盒用优化好的包被缓冲液，将包被抗原（ALB）稀释成0.1ug/ml，1.0ug/ml，2.0ug/ml，4.0 ug/ml，6.0 ug/ml，8.0 ug/ml，10.0 ug/ml等六个浓度，包被微孔板，每孔100ul；竞争抗原浓度为4.0 ug/ml，2.0 ug/ml；酶标抗体稀释度为1：300，经孵育、显色、终止后用自动酶标仪分析。显色的强度在一定范围内与包被的抗原量成正比，但随着包被抗原浓度的增加，显色的强度反而降低，我们选择临界包被值作为包被抗原量。
ADRB1    肾上腺素能受体β1抗体
ADRB2    肾上腺素能受体β2/β2-AR抗体
AGEs    晚期糖基化终末产物抗体
Aggrecan1    软骨蛋白聚糖抗体
ALAS-E    5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
ASPP1    p53凋亡刺激蛋白1抗体
ASPP2    P53凋亡刺激蛋白2抗体
ARIP2B    激活素受体2B抗体
AIMP2    AIMP2抗体
ACHE    乙酰胆碱酶抗体
ALAS1    5-氨基乙酰丙酸合酶1抗体
alpha Defensin 1    防御素α1/3抗体
ABCG4    ABC膜转运蛋白抗体
ATEXPA10    植物延长蛋白（拟南芥）
A Raf    A-Raf抗体
Phospho-A Raf(Ser299)    磷酸化A-Raf抗体
AMPD3    红细胞腺苷脱氨酶3抗体
ABP    雄激素结合蛋白抗体
ALR    肝再生增强因子抗体
Amyloid Precursor Protein    APP/ABPP淀粉样肽前体蛋白抗体
AFP(A2)    甲胎蛋白单克隆抗体（包被）